其他中文名稱(chēng) : Hotstart Taq酶
英文名稱(chēng) : Hotstart Taq DNA Polymerase
分子量 : 94kDa,單體
級(jí) 別 : BR
純 度 : ≥99%
濃 度 : 5u/ul
活性定義 : 在74℃、30分鐘內(nèi),使10nmol脫氧核糖核酸合成滲入多聚核苷酸(吸附在DE-81上)所需的酶量
酶活性分析混合物 : 25mM TAPS(PH9.3,25℃), 50mM KC1, 2mM MgCL2, 0.2mM各種dATP,dGTP,dTTP, 0.1mM dCTP, 0.75mM活化的鮭魚(yú)精DNA和0.4MBq/ML(3H).-dTTP
保存緩沖液組分 : 20mM Tris-HCL(PH9.0), 1mM DTT, 0.1mM EDTA,100mM KC1, 0.5%(V/V) Tween 20,0.5%(v/v) Nonidet P40和50%(v/v)甘油
10×Hot start PCR Buffer : 200mM Tris-HCL(PH8.3,25℃), 200mM KC1, 50mM (NH4)2SO4
抑制劑 : 陰離子去污劑(脫氧膽酸、肌氨酰和SDS的濃度分別高于0.06、0.02和0.01%時(shí))
失活 : 酚/氯仿抽提
質(zhì)量控制 : 相關(guān)測(cè)試表明無(wú)內(nèi)切或外切脫氧核糖核酸酶、核糖核酸酶污染
功能啟動(dòng) : 熱啟動(dòng)PCR
性 狀 : 液體。設(shè)計(jì)用于增強(qiáng)DNA擴(kuò)增的特異性、敏感性和產(chǎn)量。使用該酶可在室溫配制反應(yīng)體系,使用方便。它是一種化學(xué)修飾的重組Taq DNA Polymerase,蛋白分子氨基酸殘基上增加了熱不穩(wěn)定的封閉基團(tuán)。該酶在室溫下沒(méi)有活性,避免形成引物二聚體和非特異性延伸,從而增加DNA擴(kuò)增的特異性。95℃加熱4分鐘可恢復(fù)活性。活化的酶具有與Taq DNA Polymerase相同的功能:催化5——3方向合成DNA,無(wú)可檢測(cè)的3——5校正外切酶活性,具有較低的5——3外切酶活性。該酶還具有脫氧核糖核酸酶轉(zhuǎn)移活性,在PCR產(chǎn)物的3-端多加11個(gè)腺嘌呤,活化前檢測(cè)不到這些活性。
用 途 : 生化研究。高產(chǎn)量擴(kuò)增復(fù)雜模板;PCR特異性高-降低錯(cuò)配效應(yīng)和減少引物二聚體的生成;增強(qiáng)的PCR敏感性;使用方便,室溫配制PCR反應(yīng)體系;擴(kuò)增產(chǎn)物具有3-dA突出末端;熱啟動(dòng)PCR;高產(chǎn)量擴(kuò)增長(zhǎng)達(dá)3kb片段;RT-PCR;特異性擴(kuò)增復(fù)雜cDNA和基因組模板;擴(kuò)增低拷貝DNA模板;實(shí)時(shí)PCR;多重PCR;制備TA克隆用PCR產(chǎn)物
保 存 : -20℃,保質(zhì)期1年