基本信息
產(chǎn)品品牌 :通蔚生物
中文名稱 :大鼠成肌細(xì)胞
細(xì)胞簡稱 :L6
細(xì)胞別稱 :L-6;L-6m yoblast
細(xì)胞形態(tài) :成肌細(xì)胞樣
生長特性 :貼壁細(xì)胞
培養(yǎng)環(huán)境 :空氣,95% ;CO2,5% 37℃
凍存條件 :55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40% FBS+5% D M SO液氮
完全培養(yǎng)基 :DM EM (PM 150210)+10% F B S(164210-50)+1% P /S(P B 180120)
傳代步驟
1、吸出原培養(yǎng)液。
2、加入2ml左右PBS,輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)瓶潤洗細(xì)胞,吸出PBS丟棄。
3、加入1ml左右0.25% 胰蛋白酶溶液(含ED TA ),輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)瓶使之浸潤所有細(xì)胞。
4、放入培養(yǎng)箱消化,顯微鏡下看到細(xì)胞塊中間的細(xì)胞明顯變圓有間隙時(shí)可終止,全程不要拍打培養(yǎng)瓶。
5、加入3ml含血清的培養(yǎng)基終止消化,吹打細(xì)胞使之脫壁并在液體里反復(fù)吹打使細(xì)胞盡量呈單顆細(xì)胞的懸浮液。
6、收集細(xì)胞懸液離心,1200rpm /min 3分鐘,離心完吸出上清丟棄。
7、加入新鮮培養(yǎng)基,吹打幾下混勻細(xì)胞即可,按比例接種到新培養(yǎng)瓶,補(bǔ)足培養(yǎng)基,擰松瓶蓋或使用透氣瓶蓋進(jìn)行培養(yǎng)。
消化時(shí)間 :1~ 2分鐘
傳代比例(密度) :1:3-1:4
換液頻次 :2~ 3次/周
細(xì)胞背景描述
L6成肌細(xì)胞是由Y affe從甲基膽蒽存在下大鼠大腿肌的原代培養(yǎng)物最初兩代中分離得到。L6細(xì)胞在培養(yǎng)基中可融合形成多核的肌管和橫紋肌纖維。L6細(xì)胞融合的程度隨著代數(shù)的增加而下降;因而,L6細(xì)胞應(yīng)冷凍于低代次階段并周期性地重新克隆以選擇融合能力強(qiáng)的細(xì)
胞。如果讓培養(yǎng)容器中的細(xì)胞長滿,L6細(xì)胞的成肌組分將迅速耗盡。
組織來源 :骨胳肌;成肌細(xì)胞
細(xì)胞類型 :轉(zhuǎn)化細(xì)胞系
生物安全等級 :1
基因表達(dá) :m yosin
細(xì)胞保藏中心 :ATCC;C RL-1458 BC RJ;0141
收到常溫細(xì)胞后如何處理
細(xì)胞培養(yǎng)詳細(xì)操作步驟請參照通蔚生物細(xì)胞培養(yǎng)操作指南
1.收到常溫細(xì)胞后,及時(shí)拍照記錄有無漏液/瓶身破損現(xiàn)象。
2.用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,將細(xì)
胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí),以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3.仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如貼壁特性(貼壁/懸?。?、細(xì)胞形態(tài)、所用
基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4.靜置完成后,取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,鏡檢、拍照,記錄細(xì)胞狀態(tài)(所拍照片 將作為后續(xù)服務(wù)
依據(jù));建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照、記錄細(xì)胞生長狀態(tài)。
5.若觀察到異?;蛘邔?xì)胞有疑問,請及時(shí)跟我們聯(lián)系;對于細(xì)胞培養(yǎng)操作及培養(yǎng)??筛覀兊募夹g(shù)支持交流。