基本信息
產(chǎn)品品牌 :通蔚生物
中文名稱 :小鼠成纖維細(xì)胞
細(xì)胞簡(jiǎn)稱 : N CTC clone929 [L cell,L -929]
細(xì)胞別稱 : N CTC 929;N CTC-929;N CTC929;N CTC-929L;Lcell;Lcells;L -cell;L-
cells;Lcellline;L;S train L-929;L -929;L 929;L929;L929(N C TC );Clone
929;Earles'scells;Earle'sL cells
細(xì)胞形態(tài) : 成纖維細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性 : 貼壁細(xì)胞
完全培養(yǎng)基 : M EM (含N EA A )(PM 150410)+10% F B S(164210-50)+1%
P /S(P B 180120)
培養(yǎng)環(huán)境 : 空氣,95% ;CO2,5% 37℃
凍存條件 : 55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40% FBS+5% D M SO液氮
傳代步驟
1、吸出原培養(yǎng)液。
2、加入2ml左右PBS,輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)瓶潤(rùn)洗細(xì)胞,吸出PBS丟棄。
3、加入1ml左右0.25% 胰蛋白酶溶液(含ED TA ),輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)瓶使之浸潤(rùn)所有細(xì)胞。
4、放入培養(yǎng)箱消化,顯微鏡下看到細(xì)胞塊中間的細(xì)胞明顯變圓有間隙時(shí)可終止,全程不要拍打培養(yǎng)瓶。
5、加入3ml含血清的培養(yǎng)基終止消化,吹打細(xì)胞使之脫壁并在液體里反復(fù)吹打使細(xì)胞盡量呈單顆細(xì)胞的懸浮液。
6、收集細(xì)胞懸液離心,1200rpm /min 3分鐘,離心完吸出上清丟棄。
7、加入新鮮培養(yǎng)基,吹打幾下混勻細(xì)胞即可,按比例接種到新培養(yǎng)瓶,補(bǔ)足培養(yǎng)基,擰松瓶蓋或使用透氣瓶蓋進(jìn)行培養(yǎng)。
消化時(shí)間 : 1~ 2分鐘
傳代比例(密度) : 1:3-1:4
換液頻次 : 2~ 3次/周
細(xì)胞背景描述
N CTC clone929 [L cell,L -929,derivative ofStrain L-929]細(xì)胞是1948年3月建立的細(xì)胞系L的克隆株;細(xì)胞系L是最早建立的連續(xù)培養(yǎng)細(xì)胞系之一,而N C TC clone929 [L cell,L -929,derivative ofStrain L-929]是最早的克隆株。從一只100日齡的雄性C3H /A n小鼠的皮下疏松結(jié)締組織入脂肪組織中建立了親本細(xì)胞系L,第95代的細(xì)胞系L使用毛細(xì)管法分離單細(xì)胞建立了N C T C clone 929[L cell,L -929,derivative ofStrain L-929]。
倍增時(shí)間 : ~ 28-36小時(shí)
供體年齡 : 雄性,100日齡
組織來(lái)源 : 未知
細(xì)胞類型 : 自發(fā)永生化細(xì)胞
生物安全等級(jí) : 1
致瘤性 : Yes,inim m unosuppressed mice.
細(xì)胞保藏中心 : ATCC ; CCL-1ATCC ; C RL-6364BC RC ; 60091 BC RJ ; 0188 D SM Z ; ACC-2ECACC ; 85011425 EC A CC ; 85103115 EC A C C ; 88102702
收到常溫細(xì)胞后如何處理
細(xì)胞培養(yǎng)詳細(xì)操作步驟請(qǐng)參照通蔚生物細(xì)胞培養(yǎng)操作指南
1. 收到常溫細(xì)胞后,及時(shí)拍照記錄有無(wú)漏液/瓶身破損現(xiàn)象。
2. 用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。先不要打開(kāi)培養(yǎng)瓶蓋,將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí),以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如貼壁特性(貼壁/懸?。?、細(xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4. 靜置完成后,取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,鏡檢、拍照,記錄細(xì)胞狀態(tài)(所拍照片 將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù));建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照、記錄細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)。
5. 若觀察到異?;蛘邔?duì)細(xì)胞有疑問(wèn),請(qǐng)及時(shí)跟我們聯(lián)系;對(duì)于細(xì)胞培養(yǎng)操作及培養(yǎng)。可跟我們的技術(shù)支持交流。