基本信息
產(chǎn)品品牌 :通蔚生物
中文名稱 :小鼠胚胎成纖維細胞
細胞簡稱 :3T 3-Swissalbino
細胞形態(tài) :成纖維細胞樣
生長特性 :貼壁細胞
培養(yǎng)環(huán)境 :空氣,95% ;CO2,5% 37℃
凍存條件 :55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40% FBS+5% D M SO液氮
完全培養(yǎng)基 :DM EM (PM 150210)+10% F B S(164210-50)+1% P /S(P B 180120)
傳代步驟
1、吸出原培養(yǎng)液。
2、加入2ml左右PBS,輕輕晃動培養(yǎng)瓶潤洗細胞,吸出PBS丟棄。
3、加入1ml左右0.25% 胰蛋白酶溶液(含ED TA ),輕輕晃動培養(yǎng)瓶使之浸潤所有細胞。
4、放入培養(yǎng)箱消化,顯微鏡下看到細胞塊中間的細胞明顯變圓有間隙時可終止,全程不要拍打培養(yǎng)瓶。
5、加入3ml含血清的培養(yǎng)基終止消化,吹打細胞使之脫壁并在液體里反復(fù)吹打使細胞盡量呈單顆細胞的懸浮液。
6、收集細胞懸液離心,1200rpm /min 3分鐘,離心完吸出上清丟棄。
7、加入新鮮培養(yǎng)基,吹打幾下混勻細胞即可,按比例接種到新培養(yǎng)瓶,補足培養(yǎng)基,擰松瓶蓋或使用透氣瓶蓋進行培養(yǎng)。
消化時間 :1~ 2分鐘
傳代比例(密度) :1:2-1:4
換液頻次 :2~ 3次/周
細胞背景描述
3T 3-Swissalbino細胞是于1962年從分解的瑞士小鼠胚胎中建立的,3T 3-Swissalbino細胞在生長過程中會發(fā)生接觸抑制,一個長滿的單層產(chǎn)量是40000cells/cm ^ 2,其飽和密度可以達到約50000cells/cm ^2。測試表明,3T 3-Swissalbino細胞肢骨發(fā)育畸形病毒(鼠痘)陰性;3T 3-Swissalbino細胞應(yīng)在塑料瓶中生長,在玻璃器皿表面上可能長不好。
倍增時間 :~ 40小時
供體年齡 :胚胎
組織來源 :胚胎;成纖維細胞
細胞類型 :自發(fā)永生化細胞
生物安全等級 :1
細胞保藏中心 :ATCC;CCL-92D SM Z;ACC-173ECACC;85022108
收到常溫細胞后如何處理
細胞培養(yǎng)詳細操作步驟請參照通蔚生物細胞培養(yǎng)操作指南
1. 收到常溫細胞后,及時拍照記錄有無漏液/瓶身破損現(xiàn)象。
2. 用75%酒精擦拭細胞培養(yǎng)瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,將細胞置于細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時,以便穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
3. 仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關(guān)信息,如貼壁特性(貼壁/懸?。?、細胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4. 靜置完成后,取出細胞培養(yǎng)瓶,鏡檢、拍照,記錄細胞狀態(tài)(所拍照片 將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù));建議細胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照、記錄細胞生長狀態(tài)。
5. 若觀察到異常或者對細胞有疑問,請及時跟我們聯(lián)系;對于細胞培養(yǎng)操作及培養(yǎng)??筛覀兊募夹g(shù)支持交流。