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U-2OS人骨肉瘤細(xì)胞
基本信息
產(chǎn)品品牌 ： 通蔚生物
中文名稱(chēng) ： 人骨肉瘤細(xì)胞
細(xì)胞簡(jiǎn)稱(chēng) ： U-2O S[U2O S]
細(xì)胞形態(tài) ： 上皮細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性 ： 貼壁細(xì)胞
培養(yǎng)環(huán)境 ： 空氣，95% ；CO2，5% 37℃
凍存條件 ： 55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40% FBS+5% DMSO 液氮
完全培養(yǎng)基 ： McCoy's5A (PM150710)＋10%FBS(164210-50)＋1%P/S(PB180120)
傳代步驟
1、吸出原培養(yǎng)液。
2、加入2ml左右PBS，輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)瓶潤(rùn)洗細(xì)胞,吸出PBS丟棄。
3、加入1ml左右0.25% 胰蛋白酶溶液（含ED TA ），輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)瓶
使之浸潤(rùn)所有細(xì)胞。
4、放入培養(yǎng)箱消化，顯微鏡下看到細(xì)胞塊中間的細(xì)胞明顯變圓有間隙時(shí)可終止，全程不要拍打培養(yǎng)瓶。
5、加入3ml含血清的培養(yǎng)基終止消化，吹打細(xì)胞使之脫壁并在液體里反復(fù)吹打使細(xì)胞盡量呈單顆細(xì)胞的懸浮液。
6、收集細(xì)胞懸液離心，1200rpm /min 3分鐘，離心完吸出上清丟棄。
7、加入新鮮培養(yǎng)基，吹打幾下混勻細(xì)胞即可，按比例接種到新培養(yǎng)瓶，補(bǔ)足培養(yǎng)基，擰松瓶蓋或使用透氣瓶蓋進(jìn)行培養(yǎng)。
消化時(shí)間 ： 2~ 3分鐘
換液頻次 ： 2~ 3次/周
傳代比例（密度） ： 1:3-1:4
細(xì)胞背景描述
細(xì)胞類(lèi)型 ： 腫瘤細(xì)胞
U-2OS細(xì)胞(原名2T )是由PontenJ和 Sak selaE在1964年從一名15歲女孩的脛骨中等分化的肉瘤中分離建立的。U -2 O S細(xì)胞與W I-3 8細(xì)胞共培養(yǎng)或用抗猴空泡病毒SV40、呼吸道合胞病毒RSV或腺病毒的補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)(CF法)未檢測(cè)到病毒。U-2OS細(xì)胞表達(dá)胰島素樣生長(zhǎng)因子I、II(IG F-I、IG F-II)受體和骨肉瘤衍生生長(zhǎng)因子(O D G F)。
倍增時(shí)間 ： 25-30 hours
供體年齡 ： 女
組織來(lái)源 ： 骨；骨肉瘤
細(xì)胞類(lèi)型 ： 腫瘤細(xì)胞
腫瘤類(lèi)型 ： 肉瘤細(xì)胞
受體表達(dá) ： in sulin-like grow th factorI(IG F-I);in sulin-like grow th factorII(IG F II)
抗原表達(dá) ： Blood TypeA;Rh+;HLA A2,Aw30,B12,Bw 35,B 40(+ /-)
基因表達(dá) ： osteosacom a derived growth factor(O D G F),Blood TypeA;Rh+;HLA A2,Aw30,B12,Bw 35,B 40(+ /-)
生物安全等級(jí) ： 1
細(xì)胞保藏中心 ： ATCC ; H TB-96D SM Z ; ACC-785ECACC ; 92022711
收到常溫細(xì)胞后如何處理
細(xì)胞培養(yǎng)詳細(xì)操作步驟請(qǐng)參照通蔚生物細(xì)胞培養(yǎng)操作指南
1. 收到常溫細(xì)胞后，及時(shí)拍照記錄有無(wú)漏液/瓶身破損現(xiàn)象。
2. 用75% 酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。先不要打開(kāi)培養(yǎng)瓶蓋，將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí)，以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書(shū)，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如貼壁特性（貼壁/懸浮）、細(xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4. 靜置完成后，取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶，鏡檢、拍照，記錄細(xì)胞狀態(tài)（所拍照片 將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）；建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照、記錄細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)。
5. 若觀察到異?；蛘邔?duì)細(xì)胞有疑問(wèn)，請(qǐng)及時(shí)跟我們聯(lián)系；對(duì)于細(xì)胞培養(yǎng)操作及培養(yǎng)注意事項(xiàng)有疑問(wèn)的，可跟我們的技術(shù)支持交流。
