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  • 293T[HEK-293T]人胚腎細(xì)胞

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    • 品牌 : 通蔚生物
    • 目錄號(hào) : TW35141
    • 應(yīng)用 : 僅供科研使用
    • 保存條件 : 低溫保存
    • 貨期 : 現(xiàn)貨
    • 商品庫(kù)存:100
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基本信息
產(chǎn)品品牌 :通蔚生物
中文名稱 :人胚腎細(xì)胞
細(xì)胞簡(jiǎn)稱 :293T [H EK -293T]
細(xì)胞別稱 :H ek293T;H EK-293T;HEK 293T;H EK -293-T;HEK 293 T;293-T;293 T;293T;H um anEm bryonicKidney 293T;293tsA 1609neo
細(xì)胞形態(tài) :上皮細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性 :貼壁細(xì)胞
培養(yǎng)環(huán)境 :空氣,95% ;CO2,5% 37℃
凍存條件 :55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40% FBS+5% D M SO液氮
完全培養(yǎng)基 :DM EM (PM 150210)+10% F B S(164210-50)+1% P /S(P B 180120)

傳代步驟
1、吸出原培養(yǎng)液。
2、加入2ml左右PBS,輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)瓶潤(rùn)洗細(xì)胞,吸出PBS丟棄。
3、加入1ml左右0.25% 胰蛋白酶溶液(含ED TA ),輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)瓶使之浸潤(rùn)所有細(xì)胞。
4、放入培養(yǎng)箱消化,顯微鏡下看到細(xì)胞塊中間的細(xì)胞明顯變圓有間隙時(shí)可終止,全程不要拍打培養(yǎng)瓶。
5、加入3ml含血清的培養(yǎng)基終止消化,吹打細(xì)胞使之脫壁并在液體里反復(fù)吹打使細(xì)胞盡量呈單顆細(xì)胞的懸浮液。
6、收集細(xì)胞懸液離心,1200rpm /min 3分鐘,離心完吸出上清丟棄。
7、加入新鮮培養(yǎng)基,吹打幾下混勻細(xì)胞即可,按比例接種到新培養(yǎng)瓶,補(bǔ)足培養(yǎng)基,擰松瓶蓋或使用透氣瓶蓋進(jìn)行培養(yǎng)。
消化時(shí)間 :0.5~ 1分鐘
換液頻次 :2~ 3次/周
傳代比例(密度) :1:3-1:4

收貨注意事項(xiàng)
若收到細(xì)胞大片脫落,請(qǐng)按照如下處理方式處理
1、將培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)所有培養(yǎng)基 轉(zhuǎn)入無(wú)菌離心管,離心收集細(xì)胞(1200rpm 3min)去除舊培養(yǎng)基。
2、用 PBS 重懸細(xì)胞,將所有細(xì)胞收集到一個(gè)離心管中,再次離心(1200rp m 3min)去除PBS。
3、加入1ml左右0.25% 胰酶重懸細(xì)胞,混勻即可,不能吹打太多次,放入培養(yǎng)箱消化3
分鐘。
4、消化好后,用移液槍輕輕吹打細(xì)胞懸液,使細(xì)胞團(tuán)分散,迅速加入3-5ml含血清的培養(yǎng)基混勻以終止消化,離心(1200rpm3min)去除胰酶。
5、加入5ml左右的細(xì)胞相應(yīng)的完全培養(yǎng)基混勻,按比例接入無(wú)菌培養(yǎng)瓶/皿中(首次傳代推薦1:3)。

細(xì)胞背景描述
293T細(xì)胞是293 [H EK -293]細(xì)胞株插入了SV 40 T-antigen的溫度敏感基因形成的高轉(zhuǎn)衍生株。
倍增時(shí)間 :~ 24-30 hours
供體年齡 :胚胎
組織來(lái)源 :腎
細(xì)胞類型 :轉(zhuǎn)化細(xì)胞系
生物安全等級(jí) :1
細(xì)胞保藏中心 :ATCC ; C RL-3216 D SM Z ; AC C -635

收到常溫細(xì)胞后如何處理
細(xì)胞培養(yǎng)詳細(xì)操作步驟請(qǐng)參照通蔚生物細(xì)胞培養(yǎng)操作指南
1. 收到常溫細(xì)胞后,及時(shí)拍照記錄有無(wú)漏液/瓶身破損現(xiàn)象。
2. 用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí),以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如貼壁特性(貼壁/懸浮)、細(xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4. 靜置完成后,取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,鏡檢、拍照,記錄細(xì)胞狀態(tài)(所拍照片 將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù));建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照、記錄細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)。
5. 若觀察到異?;蛘邔?duì)細(xì)胞有疑問(wèn),請(qǐng)及時(shí)跟我們聯(lián)系;對(duì)于細(xì)胞培養(yǎng)操作及培養(yǎng)??筛覀兊募夹g(shù)支持交流。

售前須知
該細(xì)胞貼壁松散,操作時(shí)請(qǐng)盡量輕柔;換液時(shí)需預(yù)熱培養(yǎng)基;收貨如有大塊脫落的細(xì)胞團(tuán),為正?,F(xiàn)象,請(qǐng)按照收貨注意事項(xiàng)處理。