幾丁質(zhì)外切酶試劑盒分光法/24樣
測定規(guī)格:24樣
有 效 期:6個(gè)月
測定方法:分光光度法
保存條件:低溫避光保存
產(chǎn)品簡介:
多種微生物、動物、植物等都可產(chǎn)生幾丁質(zhì)酶,高等植物本身不存在作為真菌細(xì)胞壁組分之一的幾丁質(zhì),但當(dāng)植物受到病原菌感染時(shí),幾丁質(zhì)酶活性迅速提高。因此該酶與植物對病原微生物的抗性有關(guān),是重要的病程相關(guān)蛋白。
幾丁質(zhì)酶主要水解幾丁質(zhì)多聚體中β-1,4-糖苷鍵。依據(jù)水解位置的不同可分為幾丁質(zhì)內(nèi)切酶和幾丁質(zhì)外切酶,幾丁質(zhì)外切酶作用于幾丁質(zhì)后,生成 N-乙酰氨基葡萄糖單體,進(jìn)一步與鐵氰化鉀反應(yīng),于 420nm 處檢測,進(jìn)而計(jì)算得到幾丁質(zhì)外切酶活性大小。
2. 把母液稀釋成以下濃度梯度的標(biāo)準(zhǔn)品:0, 0.02, 0.04, 0.06, 0.08, 0.1mg/mL。
3. 依據(jù)第④步驟的加樣體系:360μL 標(biāo)準(zhǔn)品+480μL 試劑六,混勻,95-100℃煮沸 10min,取全部液體至 1mL 比色皿中于 420nm 處讀取各管吸光值 A,標(biāo)準(zhǔn)品的質(zhì)量作為橫坐標(biāo),0 mg/mL 對應(yīng)的 A值減去各濃度標(biāo)準(zhǔn)品對應(yīng)的 A 之差作為縱坐標(biāo),即可得出標(biāo)準(zhǔn)曲線。
測定規(guī)格:24樣
有 效 期:6個(gè)月
測定方法:分光光度法
保存條件:低溫避光保存
多種微生物、動物、植物等都可產(chǎn)生幾丁質(zhì)酶,高等植物本身不存在作為真菌細(xì)胞壁組分之一的幾丁質(zhì),但當(dāng)植物受到病原菌感染時(shí),幾丁質(zhì)酶活性迅速提高。因此該酶與植物對病原微生物的抗性有關(guān),是重要的病程相關(guān)蛋白。
幾丁質(zhì)酶主要水解幾丁質(zhì)多聚體中β-1,4-糖苷鍵。依據(jù)水解位置的不同可分為幾丁質(zhì)內(nèi)切酶和幾丁質(zhì)外切酶,幾丁質(zhì)外切酶作用于幾丁質(zhì)后,生成 N-乙酰氨基葡萄糖單體,進(jìn)一步與鐵氰化鉀反應(yīng),于 420nm 處檢測,進(jìn)而計(jì)算得到幾丁質(zhì)外切酶活性大小。
所需的儀器和用品:
可見分光光度計(jì)、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、天平、水浴鍋、低溫離心機(jī)、鹽酸。
幾 丁 質(zhì) 外 切 酶 活 性 測 定:
建議正式實(shí)驗(yàn)前選取 2 個(gè)樣本做預(yù)測定,了解本批樣品情況,熟悉實(shí)驗(yàn)流程,避免實(shí)驗(yàn)樣本和試劑浪費(fèi)!
標(biāo)準(zhǔn)曲線制作過程:
1. 制備標(biāo)準(zhǔn)品母液(1mg/mL):標(biāo)準(zhǔn)品臨用前加 2mL 蒸餾水,即為 1mg/mL。2. 把母液稀釋成以下濃度梯度的標(biāo)準(zhǔn)品:0, 0.02, 0.04, 0.06, 0.08, 0.1mg/mL。
3. 依據(jù)第④步驟的加樣體系:360μL 標(biāo)準(zhǔn)品+480μL 試劑六,混勻,95-100℃煮沸 10min,取全部液體至 1mL 比色皿中于 420nm 處讀取各管吸光值 A,標(biāo)準(zhǔn)品的質(zhì)量作為橫坐標(biāo),0 mg/mL 對應(yīng)的 A值減去各濃度標(biāo)準(zhǔn)品對應(yīng)的 A 之差作為縱坐標(biāo),即可得出標(biāo)準(zhǔn)曲線。