細胞基本信息
細胞名稱 |
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貨 號 |
TW-CC3752 |
細胞品牌 |
通蔚生物 |
種屬來源 |
人 |
組織來源 |
外周血 |
生長特性 |
貼壁生長 |
細胞形態(tài) |
淋巴母細胞樣 |
細胞簡介 |
Luciferase MV4-11細胞穩(wěn)定表達螢光蛋白。該細胞株性狀穩(wěn)定,培養(yǎng)時不需要添加抗生素維持??捎米魑灩獾鞍谆钚詸z測中的陽性對照,也可用于活體動物成像實驗。該細胞通過慢病毒轉染的方式攜帶GFP基因。MV4-11細胞系來自一名10歲男性雙表型B-粒單核細胞白血病患者的母細胞,由Rovera建立。生長因子,粒細胞/巨噬細胞集落刺激因子(GM-CSF)是建立該細胞系所必需的,生長因子是其在化學限定的培養(yǎng)基中持續(xù)增殖所必需的。 |
活性檢測報告 |
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puro藥篩濃度 |
MV4-11-LUC-eGFP細胞puro藥篩濃度為0.5ug/ml,培養(yǎng)過程中可不用再添加puro,如若擔心抗性隨著傳代時間降低,可定期用0.2ug/ml濃度puro維持 |
生物安全等級 |
1 |
細胞規(guī)格 |
1x10?cells/T25培養(yǎng)瓶或者1mL凍存管 |
保藏機構 |
ATCC |
培養(yǎng)基 |
IMDM+10% FBS+PS |
培養(yǎng)條件 |
氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37℃ |
凍存條件 |
無血清凍存液,液氮儲存 |
細胞貨期 |
2周左右 |
發(fā)貨方式 |
復蘇發(fā)貨(T25瓶免運輸費用)/ 凍存發(fā)貨(需加干冰運輸費用) |
供應范圍 |
僅限于科研實驗使用,絕不可作為動物或人類疾病的治療產(chǎn)品使用 |
細胞培養(yǎng)操作
T25瓶 |
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收貨處理 |
觀察好細胞狀態(tài)后,75%酒精消毒瓶壁,將T25瓶置于37度培養(yǎng)箱放置2-4h,以便穩(wěn)定細胞狀態(tài) |
傳代密度 |
細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng) |
傳代比例 |
首次傳代建議1:2傳代,1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿 |
傳代方法 |
a、將細胞懸液裝入無菌離心管中,1000 rpm離心5 min,棄去上清液,補加1-2 mL培養(yǎng)液后吹勻。 b、將細胞懸液按1:2比例分到新的含8 mL培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。 |
注意事項
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1.運輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細胞,請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。 2.因運輸問題,部分細胞由于溫度變化及劇烈碰撞死亡破碎形成碎片,是正?,F(xiàn)象。 |
凍存管 |
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收貨處理 |
收到細胞后,需立即轉入液氮凍存或直接復蘇 |
傳代密度 |
第二天換液并檢查細胞密度 |
傳代比例 |
一管細胞建議接種到10cm培養(yǎng)皿或者T25瓶 |
傳代方法 |
將含有1 mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加4 mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000 rpm條件下離心3 min,棄去上清液,加1-2 mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入含適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或將細胞懸液加入10 cm皿中,加入約8 mL培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。 |
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1.收貨時若發(fā)現(xiàn)干冰化完,檢查凍存管是否融化,若已融化需直接離心細胞接種觀察,若未融化可以將細胞按正常步驟保存。 2.為保證細胞的高存活率,收到產(chǎn)品后,請立即解凍復蘇細胞。 |
細胞凍存操作
凍存液配方 |
無血清凍存液,液氮儲存 |
細胞密度 |
待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例 |
凍存方法 |
a、收集細胞及細胞培養(yǎng)液,裝入無菌離心管中,1000 rpm條件下離心4 min,棄去上清液,用PBS清洗一遍,棄盡PBS,進行細胞計數(shù)。 b、根據(jù)細胞數(shù)量加入無血清細胞凍存液,使細胞密度5x106~1x107/mL,輕輕混勻,每支凍存管凍存1mL細胞懸液,注意凍存管做好標識。 c、將凍存管放入-80℃冰箱,24 h后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
注意事項 |
凍存細胞轉入液氮后及時復蘇一管檢查細胞凍存活性,若有異常,及時調(diào)整實驗方案 |
售后服務
細胞予 |
1.細胞運輸中遭遇的各種問題,細胞丟失瓶身破損、培養(yǎng)液嚴重漏液等,重發(fā)。 |
2.收到細胞未開封,如出現(xiàn)污染狀況,重發(fā)。 |
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3.收到細胞3天內(nèi),發(fā)現(xiàn)污染問題,經(jīng)核實后,重發(fā)。 |
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4.常溫發(fā)貨的細胞靜置2小時后,干冰凍存發(fā)貨細胞復蘇2天后,絕大多數(shù)細胞未存活,經(jīng)核實后,重發(fā)。 |
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5.常溫發(fā)貨的細胞靜置22小時并且未開封或干冰凍存發(fā)貨的細胞復蘇2天后,出現(xiàn)污染,經(jīng)核實后,重發(fā)。 |
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6.細胞活性問題,請在收到產(chǎn)品3天內(nèi)給我們提出真實的實驗結果,用臺盼藍染色法鑒定細胞活力,經(jīng)核實后,重發(fā)。 |
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細胞不予 |
1.客戶操作造成細胞污染,不重發(fā)。 |
2.客戶嚴重操作失誤致細胞狀態(tài)不好,不重發(fā)。 |
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3.非我們推薦細胞培養(yǎng)體系致的細胞狀態(tài)不好,不重發(fā)。 |
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4.細胞狀態(tài)不好,未提供真實清晰的培養(yǎng)前3天的細胞狀態(tài)照片,不重發(fā)。 |
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5.細胞培養(yǎng)時經(jīng)其它處理導致細胞出現(xiàn)問題的,不重發(fā)。 |
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6.收到細胞發(fā)現(xiàn)問題與客服人員溝通的時間證明大于3天的,不重發(fā)。 |
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特別說明 |
上海通蔚生物客戶在細胞培養(yǎng)過程中,有任何技術問題可以撥打免費服務電話 : 021-54845833 ,我們隨時給予實驗中的免費解答。 |