英文名稱 : T7 DNA Polymerase
分子量 : 由2個亞基組成,804kDa多肽(T7噬菌體基因5表達產(chǎn)物)和12kDa硫氧還蛋白(大腸桿菌trxA基因表達產(chǎn)物)
級 別 : BR
來 源 : 兩個大腸桿菌菌株,一個菌株含有T7噬菌體克隆基因5,另一個菌株含有大腸桿菌克隆基因trxA
濃 度 : 10u/ul
活力定義 : 在37°C條件下,30分鐘內(nèi)能使10 nmol 的脫氧核糖核苷酸摻入多聚核苷酸片段(吸附在DE-81上)所需的酶量
活性分析混合物 : 40mM Tris-HCL(PH7.5), 1mM DTT, 10mM MgCL2, 0.1mg/ml BSA, 0.033mM各種dNTP,0.4MBq/ML(3H)-dTTP和0.5mM堿性變性的牛胸腺DNA
保存緩沖液組分 : 20mM 磷酸鉀(PH7.4), 0.1mM EDTA, 1mM DTT和50%(v/v)甘油
10×反應(yīng)緩沖液 : 400mM Tris-HCL(PH7.5,25℃), 100mM MgCL2, 10mM DTT
抑制劑 : 金屬螯合劑,修飾試劑(無水醋酸和N-乙基順丁烯二酰亞胺可使3'→5' 外切核酸酶失活,但不影響聚合酶活性
失 活 : 75℃加熱10分鐘
質(zhì)量控制 : 測試表明無內(nèi)切脫氧核糖核酸酶污染
使用注意 : 37℃分析時需要短時間孵育
性 狀 : 懸浮液,重組酶。T7 DNA聚合酶是一種模板依賴型DNA聚合酶,催化5'→3'方向的DNA合成。該DNA聚合酶具有高持續(xù)合成能力,可持續(xù)合成長片段DNA。該酶對單鏈和雙鏈DNA具有3'→5'外切核酸酶活性
用 途 : 生化研究。除去殘留的基因組DNA,純化共價閉環(huán)的DNA分子;長片段引物延伸反應(yīng);DNA 3'-末端標記;定點突變位點的鏈延伸反應(yīng);DNA 5'-突出點位補平;第二鏈cDNA合成;原位檢測凋亡相關(guān)DNA片段
保 存 : -20°C