基本信息
產(chǎn)品品牌 : 通蔚生物
中文名稱 :小鼠畸胎瘤細(xì)胞
細(xì)胞簡(jiǎn)稱 : P19 [P-19]
細(xì)胞形態(tài) : 上皮細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性 : 貼壁細(xì)胞
培養(yǎng)環(huán)境 : 空氣,95% ;CO2,5% 37℃
凍存條件 : 55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40% FBS+5% D M SO液氮
完全培養(yǎng)基 : M EM α(PM 150421)+7.5% C S+2.5% F B S(164210-50)+1%P /S(P B 180120)
傳代步驟
1、吸出原培養(yǎng)液。
2、加入2ml左右PBS,輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)瓶潤(rùn)洗細(xì)胞,吸出PBS丟棄。
3、加入1ml左右0.25% 胰蛋白酶溶液(含ED TA ),輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)瓶使之浸潤(rùn)所有細(xì)胞。
4、放入培養(yǎng)箱消化,顯微鏡下看到細(xì)胞塊中間的細(xì)胞明顯變圓有間隙時(shí)可終止,全程不要拍打培養(yǎng)瓶。
5、加入3ml含血清的培養(yǎng)基終止消化,吹打細(xì)胞使之脫壁并在液體里反復(fù)吹打使細(xì)胞盡量呈單顆細(xì)胞的懸浮液。
6、收集細(xì)胞懸液離心,1200rpm /min 3分鐘,離心完吸出上清丟棄。
7、加入新鮮培養(yǎng)基,吹打幾下混勻細(xì)胞即可,按比例接種到新培養(yǎng)瓶,補(bǔ)足培養(yǎng)基,擰松瓶蓋或使用透氣瓶蓋進(jìn)行培養(yǎng)。
消化時(shí)間 : 1~ 2分鐘
傳代比例(密度) : 1:3-1:4
換液頻次 : 2~ 3次/周
細(xì)胞背景描述
P19細(xì)胞是從C 3H /H e小鼠中誘導(dǎo)的畸胎癌中建立的;P19細(xì)胞在含有0.1mM β-巰基乙醇的培養(yǎng)基中克隆的效率高。細(xì)胞具有多能性:在500nM 維生素A酸誘導(dǎo)下,細(xì)胞可以分化成神經(jīng)樣和神經(jīng)膠質(zhì)樣細(xì)胞;在0.5% -1.0% 二甲亞砜(D M SO )存在下,細(xì)胞分化形成心臟和骨骼肌樣基質(zhì),但不形成神經(jīng)樣或神經(jīng)膠質(zhì)樣細(xì)胞。在D M SO 和維生素A
酸同時(shí)存在時(shí),細(xì)胞的分化與只有維生素A酸一樣。
倍增時(shí)間 : ~ 48-72小時(shí)
供體年齡 : 雄性
組織來源 : 胚胎;畸胎癌
細(xì)胞類型 : 腫瘤細(xì)胞
腫瘤類型 : 其它腫瘤細(xì)胞
生物安全等級(jí) : 1
細(xì)胞保藏中心 : ATCC ; C RL-1825 D SM Z ; ACC-316ECACC ; 95102107
收到常溫細(xì)胞后如何處理
細(xì)胞培養(yǎng)詳細(xì)操作步驟請(qǐng)參照通蔚生物細(xì)胞培養(yǎng)操作指南
1. 收到常溫細(xì)胞后,及時(shí)拍照記錄有無漏液/瓶身破損現(xiàn)象。
2. 用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí),以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如貼壁特性(貼壁/懸?。⒓?xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4. 靜置完成后,取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,鏡檢、拍照,記錄細(xì)胞狀態(tài)(所拍照片 將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù));建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照、記錄細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)。
5. 若觀察到異?;蛘邔?duì)細(xì)胞有疑問,請(qǐng)及時(shí)跟我們聯(lián)系;對(duì)于細(xì)胞培養(yǎng)操作及培養(yǎng)。可跟我們的技術(shù)支持交流。