細胞信息
細胞名稱 |
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細胞品牌 |
通蔚生物 |
種屬來源 |
人 |
組織來源 |
腦 |
生長特性 |
貼壁生長 |
細胞形態(tài) |
成纖維細胞樣 |
細胞簡介 |
人神經星形膠質細胞采用酶消化法結合差速貼壁法制備而來,人神經星形膠質細胞分離自腦組織;大腦分左右兩個半球,大腦皮質(灰質)覆蓋著每個大腦半球的大部分,它是神經元胞體集中的地方。內部則是由神經纖維或髓鞘構成的白質。每一個半球都有三個面,即外側面(約占整個皮質面積的1/3)、內側面和底面(占2/3的面積);半球表面有很多深淺不等的溝或裂,溝或裂之間的隆起叫回,它們大大增加了大腦的表面積;大腦外側面重要的溝、裂有大腦外側裂、頂枕裂和中央溝。由于三溝裂之界隔,使大腦皮質組分為額葉、頂葉、顳葉、枕葉四大部分。神經星形膠質細胞,是哺乳動物腦內分布廣泛的一類細胞,也是膠質細胞中體積大的一種。用經典的金屬浸鍍技術(銀染色)顯示此類膠質細胞呈星形,從胞體發(fā)出許多長而分支的突起,伸展充填在神經細胞的胞體及其突起之間,起支持和分隔神經細胞的作用。細胞突起的末端常膨大形成腳板或稱終足,有些腳板貼附在鄰近的毛細血管壁上,因此這些腳板又被稱為血管足或血管周足,靠近腦脊髓表面的腳板則附著在軟膜內表面,彼此連接構成膠質界膜。細胞剛分離時呈圓形,24h后大部分細胞貼壁,均勻分布于瓶底,部分細胞伸出細小突起,培養(yǎng)4-5d后細胞數量明顯增多,呈扁平、多角形,胞質豐富且核漿較少,細胞核呈橢圓形,偏于胞體一側。神經星形膠質細胞是中樞神經系統(tǒng)的重要細胞組成,不僅具有支持功能,還能夠合成及分泌多種神經活性物質,在維持神經元內外環(huán)境、生存、遷移、免疫調節(jié)、信號轉導、軸突生長及功能整合等方面具有重要作用。神經膠質細胞廣泛分布于中樞神經系統(tǒng)內,是除了神經元以外的所有細胞,在中樞神經系統(tǒng)中數量大約是神經元的十倍。具有支持、滋養(yǎng)神經元的作用。膠質細胞與神經元一樣也具有細胞凸起,但其胞質凸起不分樹突和軸突。星形膠質細胞,是膠質細胞中體積大的一種。從胞體發(fā)出許多長而分支的突起,伸展充填在神經細胞的胞體及其突起之間,起支持和分隔神經細胞的作用。 |
質量檢測 |
神經膠質纖維酸性蛋白(GFAP)免疫熒光染色法,純度高于 90%,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等 |
細胞規(guī)格 |
5x10?cells/T25或1mL凍存管 |
培養(yǎng)基 |
人嗅球神經星形膠質細胞專用培養(yǎng)基 |
培養(yǎng)條件 |
氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37℃ |
換液頻率 |
每2-3天換液一次 |
消化液 |
0.25%胰蛋白酶 |
細胞貨期 |
7-8周左右 |
發(fā)貨方式 |
復蘇發(fā)貨(免運輸費用)/ 凍存發(fā)貨(需加干冰運輸費用) |
供應范圍 |
僅限于科研實驗使用,絕不可作為動物或人類疾病的治療產品使用 |
特別說明 |
具體操作步驟以隨貨產品說明書為主 |
細胞培養(yǎng)操作
收貨處理 |
取出T25細胞培養(yǎng)瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2,飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,以穩(wěn)定細胞狀態(tài) |
傳代密度 |
細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng) |
傳代代數 |
可傳3代左右,建議收到細胞后盡快進行相關實驗 |
傳代比例 |
首次傳代建議1:2傳代,1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿 |
傳代方法
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1. 吸出T25細胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細胞一次; 2. 添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中,輕微轉動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后,吸出多余胰蛋白酶消化液,37℃溫浴1-3min;倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后,再加入5ml完全培養(yǎng)基終止消化; 3. 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代,然后補充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL,置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng); 4. 待細胞完全貼壁后,培養(yǎng)觀察;之后每2-3天換液一次新鮮的完全培養(yǎng)基。 |
注意事項
重要提醒 |
1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月。 2. 在細胞培養(yǎng)過程中,請注意保持無菌操作。 3. 傳代培養(yǎng)過程中,胰酶消化時間不宜過長,否則會影響細胞貼壁及其生長狀態(tài)。 4. 運輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細胞,請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。 |
到貨須知 |
1. 收到細胞后,首先觀察并拍照記錄細胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現象,干冰運輸的細胞檢查干冰是否完全揮發(fā),細胞是否解凍,若有上述現象發(fā)生請及時和我們聯系。 2. 靜置完成后,取出細胞培養(yǎng)瓶,鏡檢、拍照(當天以及第 2,3 天請拍照),記錄細胞狀態(tài) (所拍照片將作為后續(xù)服務依據);建議細胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照、記錄細胞生長狀態(tài)。 3. 由于運輸的原因,部分細胞由于溫度變化及劇烈碰撞死亡破碎形成碎片,是正?,F象。個別敏感細胞會出現不穩(wěn)定的情況,請及時和我們聯系,告知細胞的具體情況,以便我們的技術人員跟蹤回訪直至問題解決。 4. 仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關信息,如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子等,確保細胞培養(yǎng)條件一致,若由于培養(yǎng)條件不一致而導致細胞出現問題,責任由客戶自行承擔。 |
售后服務
細胞予重發(fā) |
1. 細胞運輸中遭遇的各種問題,細胞丟失瓶身破損、培養(yǎng)液嚴重漏液等,重發(fā)。 |
2. 收到細胞未開封,如出現污染狀況,重發(fā)。 |
3. 收到細胞3天內,發(fā)現污染問題,經核實后,重發(fā)。 |
4. 常溫發(fā)貨細胞靜置2小時后,干冰凍存發(fā)貨細胞復蘇2天后,絕大多數細胞未存活,經核實后,重發(fā)。 |
5. 常溫發(fā)貨的細胞靜置22小時且未開封或干冰凍存發(fā)貨的細胞復蘇2天后,出現污染經核實后,重發(fā)。 |
6. 細胞活性問題在收到產品3天內提出真實實驗結果,用臺盼藍染色法鑒定細胞活力,經核實后,重發(fā)。 |
細胞不予重發(fā) |
1. 客戶操作造成細胞污染,不重發(fā)。 |
2. 客戶嚴重操作失誤致細胞狀態(tài)不好,不重發(fā)。 |
3. 非我們推薦細胞培養(yǎng)體系致的細胞狀態(tài)不好,不重發(fā)。 |
4. 細胞狀態(tài)不好,未提供真實清晰的培養(yǎng)前3天的細胞狀態(tài)照片,不重發(fā)。 |
5. 細胞培養(yǎng)時經其它處理導致細胞出現問題的,不重發(fā)。 |
6. 收到細胞發(fā)現問題與客服人員溝通的時間證明大于3天的,不重發(fā)。 |
特別說明 |
上海通蔚生物客戶在細胞培養(yǎng)過程中,有任何技術問題可以撥打免費服務電話021-54845833或15800441009,我們隨時給予實驗中的免費解答。 |