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【通蔚生物】:輔酶ⅡNADP(H)含量測試盒介紹

發(fā)布時間:2024-02-26     發(fā)布作者:上海通蔚生物

通蔚生物輔酶ⅡNADP(H)含量測試盒測定意義介紹
輔酶ⅡNADP(H)含量測試盒
測定意義:
輔酶ⅡNADP(H)廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細胞中,NADP+和NADPH含量測定可以計算NADP(NADPH + NADP+ )含量和NADPH/NADP+比值,其變化與磷酸戊糖途徑和生物合成以及抗氧化反應密切相關。NADPH/NADP+比值不僅是細胞氧化還原態(tài)的主要標志之一,而且在PPP途徑、生物合成和抗氧化代謝中具有重要調控作用。
測定原理:
分別用酸性和堿性提取液提取樣品中NADP+和NADPH。NADPH通過PMS的遞氫作用,使氧化型噻唑藍(MTT)還原為甲瓚,570nm下檢測吸光值,從而測定NADPH含量。利用6-磷酸葡萄糖脫氫酶還原NADP+為NADPH,從而檢測NADP+含量。
所需的儀器和用品:
可見分光光度計、臺式離心機、可調式移液器、1 mL玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
注意事項:
1、如果一次性測定樣本數(shù)較多,可將試劑一、二、三和四按比例配成混合液。

2、對照管和測定管的測定步驟的區(qū)別:對照管加完試劑一、二、三、四和五后必須馬上加試劑六;測定管加完試劑一、二、三、四和五后必須反應 20min 后再加試劑六。

3、反應過程中注意避光。
4、若 NADP+測定中△A(A2-A1)≤0.0144,NADPH 測定中△A(A2-A1)≤0.0259,說明樣本中輔酶含量較低,已低于檢測限,可做如下調整:(1)將測定管避光靜置時間 20min 延長到 60min;(2)在提取階段增加取樣量,即取 0.2g 樣本或 0.2mL 樣本加入 1mL 提取液。

5、由于每一個測定管需要設一個對照管,本試劑盒 50 管保證測 24 個 NADP+或 NADPH。

上海通蔚生物一直致力于為廣大高校、科研院所和企事業(yè)單位提供的輔酶ⅡNADP(H)含量測試盒科研試劑和完善的技術服務,滿足生物化學、分子生物學、細胞生物學、免疫學等生物科技實驗需求。