ELISA，全稱酶聯(lián)免疫吸附測定（Enzyme-LinkedImmunosorbentAssay）。在生物學(xué)免疫實驗方法中常見的技術(shù)。這種技術(shù)廣泛應(yīng)用于生物學(xué)、醫(yī)學(xué)、食品安全、環(huán)境檢測和藥物帥選等領(lǐng)域。
ELISA基本原理是將抗原或抗體吸附在固相載體上，通過酶標(biāo)記的抗原抗體反應(yīng)進(jìn)行檢測。那么，elisa有哪些主要類型呢？
在酶聯(lián)吸附測定實驗中，elisa主要類型有直接ELISA、間接ELISA、競爭ELISA和夾心ELISA。比較常用的是夾心ELISA和競爭ELISA。上海通蔚針對這兩種類型重點為大家介紹下區(qū)別。如果你想了解ELISA其它類型，可以參考《elisa試劑盒有哪幾種類型？elisa四類型圖解》。
Elisa夾心法
Elisa夾心法是將特異性抗體結(jié)合到固相載體上形成固相抗體（捕獲抗體），然后和待檢樣本中的相應(yīng)抗原結(jié)合形成免疫復(fù)合物，洗滌后再加酶標(biāo)記抗體（檢測抗體），與免疫復(fù)合物中抗原結(jié)合形成酶標(biāo)抗體—抗原—固相抗體復(fù)合物，加底物顯色，判斷抗原含量。整個過程中，待檢抗原經(jīng)過捕獲抗體和檢測抗體雙重篩選，具有高特異性。
Elisa夾心法的優(yōu)點是特異性高、靈敏度高，但其主要缺點是捕獲抗體和檢測抗體之間存在相互作用。
Elisa競爭法
ELISA競爭法預(yù)先將抗原包被在固相載體上，并加入酶標(biāo)記的特異性抗體，實驗時，加入待檢抗原（或抗體），如果待檢物是抗原，則待檢抗原于預(yù)先包被在固相載體上的抗原競爭結(jié)合酶標(biāo)抗體，如果待檢測物是抗體，則待檢抗體就與系統(tǒng)中原有的酶標(biāo)抗體競爭結(jié)合包被在固相載體上的抗原，通過洗滌洗掉被競爭結(jié)合的酶標(biāo)抗體，最后加底物顯色，需要注意的是顯色結(jié)果與待檢抗原（或抗體）的量成反比。
Elisa競爭法的優(yōu)點是適合檢測小抗原，適合檢測復(fù)雜樣品，特異性高，靈敏度高。但是，它有一些缺點，例如每次ELISA都需要標(biāo)記抗體，這可能導(dǎo)致抗體失活，隨著靶抗原的增加信號會降低。
Elisa實驗選擇夾心法還是競爭法？
1.根據(jù)待測物質(zhì)的大?。喝舸郎y物質(zhì)為大分子抗原，如蛋白質(zhì)、多糖等，建議選擇夾心法；若待測物質(zhì)為小分子抗原或抗體，則競爭法可能更為合適。
2.根據(jù)實驗需求：若需要高靈敏度的檢測，夾心法通常是更好的選擇；若需要進(jìn)行定量或半定量檢測，競爭法則可能更適合。
3.考慮實驗操作的復(fù)雜性：夾心法相對復(fù)雜，需要兩種特異性抗體；而競爭法則相對簡單，但可能需要在實驗設(shè)計和數(shù)據(jù)分析上投入更多精力。
上述通蔚生物為大家介紹這兩種ELISA類型的區(qū)別，作為實驗室較為常用的酶聯(lián)技術(shù)，它們有各自特點。具體使用方法結(jié)合實驗需求及檢測物質(zhì)大小來確定。如果您還有關(guān)于這兩種類型ELISA其它問題，歡迎前來咨詢。
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